lucigen 60110-1 HI-Control™10G化学感受态细胞</p>
lucigen HI-Control™10G化学感受态细胞</p>
产品简介:北京中北林格供应lucigen 60110-1 HI-Control™10G化学感受态细胞,中北林格是lucigen总代理,提供lucigen产品货号报价查询。代理的其他品牌包括Biosearch technologies总代理,epicentre总代理,illumina总代理,ICLLAB总代理,ImmunoReagents总代理。</p>
产品名称:lucigen 60110-1 HI-Control™10G化学感受态细胞</p>
货号:lucigen 60110-1</p>
规格:12 rxns (SOLOs)</p>
存储温度:-80o C</p>
品牌:lucigen</p>
供应商:中北林格</p>
产地:us</p>
发货地:北京</p>
lucigen 60110-1 HI-Control™10G化学感受态细胞 产品说明书</p>
可溶性蛋白从未如此快速和简单!</p>
几秒钟内无酶定向PCR克隆!</p>
使用即用型载体和感受态细胞节省数天的努力 - 无结扎步骤。</p>
具有可切割的SUMO溶解度标签的N末端6xHis标记的蛋白的紧密控制的表达。</p>
可在T7控制下表达的系统或可调节的鼠李糖启动子。</p>
Expressioneering™技术:Expresso®产品系列概述,采用无连接酶克隆 </p>
完整的克隆和蛋白表达系统
Expresso SUMO克隆和蛋白表达系统设计用于快速,简便,高效的定向克隆和PCR扩增基因的可溶性表达。对于形成包涵体或难以以可溶形式表达的蛋白,pETite®N-His SUMO和pRham™N-His SUMO载体允许用氨基末端6xHis-SUMO蛋白标签表达靶蛋白。SUMO(小遍在蛋白样修饰物)是相对较小的(100个残基的)多肽,已显示其增强许多蛋白的可溶性表达,否则这些蛋白在大肠杆菌中难以产生 。
是基于originalExpresso T7和快报鼠李糖克隆和蛋白表达系统,其使用Expressioneering技术™以提供不费力的高效率的克隆和严格控制的蛋白表达。T7系统配有预处理的 pETite N-His SUMO克隆载体, 和两个感受态细胞系,在单个转化小瓶中提供。高效HI-Control™10G化学感受态细胞可实现稳定的克隆和HI-Control BL21(DE3)感受态细胞提供严格控制的蛋白表达,从而帮助您避免基于T7启动子的渗漏表达粒系统出现的蛋白表达问题。鼠李糖系统配有预处理的pRham N-His SUMO克隆载体和高效的 E. cloni10G感受态细胞,用于克隆和表达,实现更高的蛋白表达。可以使用标准镍色谱法快速纯化N-末端6xHis SUMO标记的重组蛋白。包括SUMO Express蛋白酶,以提供SUMO标签的有效切割,精确地在SUMO标签和靶蛋白之间的连接处。
PCR扩增基因的五次定向克隆
Expresso SUMO克隆和蛋白表达系统使用Expressioneering Technology,Expresso系统的无酶重组克隆策略,使基因与表达粒无缝整合。使用引物向PCR扩增靶基因,所述引物在基因的两端添加18个碱基对的载体互补序列。与其他基于限制酶的方法或无连接酶克隆方法不同,PCR产物不需要进一步清除或酶处理。简单地将1μl未纯化的PCR反应与提供的预处理的pETite或pRham N-His SUMO表达粒混合,并立即转化到所提供的化学感受态细胞中(图1)。
SUMO向包括:
用于高水平的强T7启动子,或用于可调节重组蛋白表达的鼠李糖启动子。
从N末端6xHis SUMO融合标签增加溶解度和快速蛋白纯化
体积小(2.5 kb),便于下游操作。
获得利的CloneSmart®技术可提高克隆效率。
用SUMO蛋白标签拯救包涵体和不溶性蛋白:
我们使用Expresso T7和Expresso T7 SUMO克隆和表达系统来表达和纯化多种蛋白。正在进行的大规模表达研究的一些结果,以鉴定来自Fibrobacter succinogenes的 水解酶 初,选择48个基因用于表达试验并克隆到pETite T7 C-His载体中。这些克隆中大约一半产生可溶性活性水解酶蛋白,而在其他情况下,靶蛋白以不溶形式表达。将产生不溶性蛋白的五种基因再扩增并克隆到pETite SUMO载体中。当所得克隆在HI-Control BL21(DE3)细胞中表达时,在五种情况中的四种中,可溶性级分中活性蛋白的回收率显着提高(表1)。尽管水解酶活性不需要去除标签,但可以通过SUMO Express蛋白酶有效去除标签。
对此产品有兴趣,可联系中北林格获取更多详细信息。</p>
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