| 琼脂糖凝胶电泳技术一、琼脂糖凝胶的特点 琼脂（agar）是一种多聚糖，主要由琼脂糖（agarose，约占80%）及琼脂胶（agaropectin）组成。琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物，不带电荷，而琼脂胶是一种含根和羧的强性多糖，由于这些团带有电荷，在电场作用下能产生较强的电渗现象，加之根可与某些蛋白作用而影响电泳速度及分离效果。因此，目前多用琼脂糖为电泳支持物进行平板电泳，其点如下。（1）琼脂糖凝胶电泳操作简单，电泳速度快，样品不需事先处理可以进行电泳。（2）琼脂糖凝胶结构均匀，含水大（约占98%~99%），近似自由电泳，样品扩散较自由电流，对样品吸附极微，因此电泳图谱清晰，分辨率高，重复性好。（3）琼脂糖透明无紫外吸收，电泳过程和结果可直接用紫外光灯检测及定测定。（4）电泳后区带易染色，样品极易洗脱，便于定测定。制成干膜可保存。 目前，常用琼脂糖作为电泳支持物，分离蛋白和同工酶。将琼脂糖电泳与免疫化学相结合，发展成免疫电泳技术，能鉴别其他方法不能鉴别的复杂体系，由于建立了超微技术，0.1ug蛋白可检出。 琼脂糖凝胶电泳也常用于分离、鉴定核，如DNA鉴定，DNA限制性内切核酶图谱制作等。由于这种方法操作方便，设备简单，需样品少，分辨能力高，已成为因工程研究中常用实验方法。二、DNA的琼脂糖凝胶电泳 琼脂糖凝胶电泳对核的分离作用主要是依据它们的相对分子及分子构型，同时与凝胶的浓度也有密切关系。 |
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