一步法荧光定耐热反转录PCR试剂盒
产品名称：ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit
英文名称：ToneScript One Step SYBR qRT-PCR kit
产品编号：TK08045
产品规格：50 μl反应× 100次
储存条件及有效期：试剂盒于-20℃避光保存，有效期12个月。
产品描述：
本试剂盒是采用SYBR Green I嵌合荧光法进行One Step qRT-PCR的用试剂。使用本试剂盒进行qRT-PCR反应可在同一反应管内连续进行，操作简单，并能有效防止污染。本反应体系由于可以对扩增产物进行实时检测，大大提高了检测的灵敏度，并省略了PCR反应后电泳的步骤，非常适合微RNA的检测。
产品特点：
本产品中使用了适合于qRT-PCR的反转录酶ToneScript RTase和抗体修饰的具有高效扩增效率的Hot Start Taq Polymerase，能进行稳定的One Step qRT-PCR反应，可以快速、准确地对RNA病毒等微RNA进行分析。本品可以在宽广的定区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定检测，重复性好，可信度高。
准备材料：
实时荧光定PCR仪、RNA模板、PCR引物、移液器枪头。
注意事项：
1、根据不同的荧光定PCR系统来决定ROX Reference Dye的使用。
2、当有多个样品进行反应时，应先配制各种试剂的混合液，然后再分装到每个反应管中，可使所取试剂体积准确，避免同一试剂多次吸取造成浪费，同时也减少每个样品之间的误差。
3、使用ToneScript One Step Enzyme Mix时应轻轻混匀，避免起泡，吸取应请短暂离心，将试剂收集到管底部，同时由于含有甘油，所以应缓慢吸取，并且枪头不宜插入液面过深，造成损失。
4、2×One Step SYBR qRT-PCR buffer溶解后要充分混合，使用Vortex等振荡完全溶解后使用。
5、本制品中使用的 Hot Start Taq Polymerase是用Taq抗体修饰的 Hot Start 高效DNA聚合酶，与化学修饰型的 Hot Start DNA聚合酶相比，不需要PCR反应前的95℃，5-10 min的预变性，高温处理时间过长，会使酶的活性下降，其PCR扩增效率和定准确度都会受到影响。
6、本产品只能用基因特异反转录引物，不能使用Random Primer和Oligo dT Primer等进行反转录反应。
RNA模板制备注意事项
RNA模板可以采用总RNA或mRNA。本试剂盒将RNA反转录成cDNA，然后对cDNA进行扩增，RNA的纯度会影响cDNA的合成，制备RNA的关键是要抑制细胞中和环境中的RNase，防止RNA降解。因此，在实验中戴性手套，使用RNA用实验台，实验中避免讲话等。相关实验耗材应用0.1%DEPC（焦碳酸二乙酯）水溶液在37℃处理12 h，并高压灭菌30 min后使用。
同科生物简介：成立于2007年，是一家集研发、生产、销售和技术服务于一体注于生命医学和生物技术领域的高科技企。主营务有科研产品、诊断试剂、分子诊断和技术服务等，主要服务于科研机构、大院校、医院和工等客户。
生产科研：同科生物搭建多个研发与合作技术平台（博士后实践基地、院士工作站、同济大学人才培养与产学研合作基地及生物研究中心等），为技术创新提供了坚实的基础保障。拥有三类体外试剂生产中心、仪器生产中心、研发检实验室等、厂房和实验面积达8000多平米，仪器设备设施（包括定PCR仪、生物安全柜、核酸蛋白测定仪、高压细胞破碎仪、FPLC等系列高端精密仪器设备）。
研发团队：同科拥有一支由中科院院士为顾问，国家千人为科学家，以博士硕士为主体的高效的化研发团队。研发人员涵盖生物化学、分子生物学、临床医学、免疫学、药物制剂、生物技术、遗传学、微生物学、生物工程领域，关联性较大，结构合理，且形成互补，在重大项目及关键技术上具备的攻关能力。
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